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无毒核酸凝胶电泳染料(BB-GelRed)图片
产品货号:
SN0028
中文名称:
无毒核酸凝胶电泳染料(BB-GelRed)
英文名称:
Safe Nucleic Acid Gel Electrophoresis Stain, BB-GelRed
产品规格:
500μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

BB-GelRed是一种安全、灵敏、稳定的荧光核酸凝胶染色试剂,适用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的dsDNA、ssDNA和RNA染色,经过本制品染色的DNA条带在紫外光投射下呈现红色荧光,可以替代溴化乙锭(EtBr)。艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于溴化乙锭(EtBr),使用更加安全。


BB-GelRed和EB具有相同的光谱特性,不需要更换成像系统,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。注意BB-GelRed不能被488nm氩离子激光器(如蓝光透射仪)或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。



产品特点:
  • 安全无毒:BB-GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内。
  • 灵敏度高:适用于各种分子量DNA电泳,对于微量的DNA具有更高的检测灵敏度。
  • 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
  • 适用范围广:胶染法(电泳前染色)和泡染法(电泳后染色)均可;适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA和RNA染色。


适用范围:
适用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的dsDNA、ssDNA和RNA染色。

产品组成:
组分规格
无毒核酸凝胶电泳染料(BB-GelRed)500μL
说明书1份

保存:室温,避光,有效期1年。

注意事项:
  • 染料无需低温冷藏,请于室温下避光储存,避免沉淀。若出现沉淀,请将染料置于45~50℃ 2min,振荡使充分溶解后再使用。
  • 由于BB-GelRed的高灵敏性,建议减少DNA样品上样量,推荐已知浓度样品的上样量为50~200ng/泳道。
  • 聚丙烯酰胺凝胶电泳请使用泡染法。


使用方法:
一、胶染法(电泳前染色,用法同EB)
  • 配制合适浓度的琼脂糖凝胶;
  • 用微波炉加热使琼脂糖完全融化;
  • 加入BB-GelRed使其终浓度为1×(即100mL凝胶中加入10μL BB-GelRed 10000×水溶液),此时溶液呈淡粉色;
  • 将含有1×BB-GelRed染液的琼脂糖溶液倒入胶槽中,插入齿梳,室温凝固;
  • 按照常规方法进行电泳;
  • 用302nm激发的UV凝胶成像系统观察结果。


二、泡染法(电泳后染色)
  • 按照常规方法进行电泳;
  • 使用0.1M NaCl溶液稀释BB-GelRed染液至3×染色液(例如将15μL BB-GelRed(10000×)水溶液加入50mL 0.1M NaCl溶液中);
  • 将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温摇床孵育30min(对于含3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,需孵育30min~1h,时间随着丙烯酰胺含量增加而延长。单次使用的3×染色液可重复使用3次左右,室温避光保存);
  • 用302nm激发的UV凝胶成像系统观察结果。


常见问题:
  • 使用胶染法,出现DNA条带弥散、拖尾或弯曲等现象?
    • 确保使用的染料终浓度为1×。
    • DNA上样量过多。将DNA样品上样量减少至1/3或1/5。
    • 凝胶浓度不合适。检测大片段DNA建议使用低浓度琼脂糖凝胶。
    • 样品中loading buffer过量。loading buffer中的SDS可能会影响电泳效果,建议减少loading buffer用量。
    • 使用合适的电压,建议5~10 V/cm。
    • 使用新鲜的电泳缓冲液。
  • 使用胶染法发现DNA迁移率存在差异?
    • 将DNA样品上样量减少至1/3或1/5。
    • BB-GelRed分子量较大,大分子量导致DNA的迁移速率可能受到染料与DNA比率的影响。因此不建议将BB-GelRed直接添加到loading buffer中使用,这会导致条带迁移不准确。
    • 可使用泡染法准确确定DNA条带大小。
  • ssDNA和RNA染色效果不如dsDNA?
    BB-GelRed对于dsDNA的灵敏度是ssDNA或RNA的5倍,可适当提高ssDNA或RNA上样量。

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